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升級款細胞電轉儀EX+

適用于血液系統領域轉染

干細胞領域轉染
各種細胞系轉染
原代細胞轉染
神經、心血管研究領域轉染

          聯系人:文女士
          電話:0755-26410427

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產品介紹

升級款細胞電轉儀EX+


產品基本信息:

品牌:Celetrix

型號:EX+

貨號:11-0106


特點:


  1. 1.界面簡潔、操作簡單,

  2. 2.可適配20ul、100ul、200ul、600ul、1ml電擊管;

  3. 3.新增細胞系模式和PBMC模式,使用更便捷;保留傳統模式(Legacy mode),用戶可以根據實驗自行設定電轉參數,得到優化的轉染效果;

  4. 4.可選配電融合模式;

5.新模式優化大質粒電轉的細胞存活率和轉染效率;

6.全新密封加壓型電擊管設計:均勻電場從管蓋到管底。可承受電轉產生氣體之壓力,在電轉瞬間壓縮氣泡,保證電場均勻;

7.適用于原代細胞,包括T,B細胞和神經細胞等。原代細胞質粒電轉化率為50-80%,mRNA或者Cas9蛋白做基因編輯電轉效率可達90%以上;

8.電脈沖參數設定方便,內部電路反應迅速,設定完成即可啟動,瞬間完成電轉。


Celetrix獨特模式,簡化電轉參數

圖片3.png

Celetrix獨特地把細胞電轉分為兩個模式:細胞系模式和PBMC模式。

絕大多數細胞系,貼壁生長的原代細胞,以及血液干細胞、刺激生長的T細胞、B細胞、NK細胞等直徑較大,這類細胞電轉參數較為接近,在細胞系模式下微調電壓就可以電轉。PBMC(外周血單個核細胞)以及未刺激的T細胞、B細胞和NK細胞等直徑較小需要電壓較高,在PBMC模式下進行電壓微調即可。兩種模式下電轉液是通用的,用戶使用非常方便。


電融合雜交瘤技術

· 細胞電融合:

Celetrix電轉儀兩個款型Model EX+和Model SLT可以加配電融合功能,進行雜交瘤克隆制備的工作。

小鼠脾臟細胞可以和SP2/0, P3X63Ag8等細胞高效電融合。只需混合細胞放入儀器即可完成,方便簡單。

由于氣泡是絕緣體,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過,這樣導致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,處于其中的細胞因承受太高的電壓而死亡。

電融合比PEG效率高,實驗穩定不易受操作人員影響;

3天可見克隆生長,10天可檢測上清。


· 小鼠雜交瘤

Celetrix電轉儀可選配細胞融合功能,高效、迅速,一只小鼠脾臟可得到10E4的克隆

圖片5.png


細胞電轉儀EX+,SLT可選配細胞融合功能,單次可處理一只小鼠脾臟細胞進行高效融合。


--------------------------------------------------------------關于Celetrix電轉儀系列-----------------------------------------------------------------


【原理】

Celetrix電轉技術即第三代電轉全新加壓電轉染技術,是通過對密封的電擊管進行加壓電擊,產生的瞬間電流把一端的細胞膜打開,幾十毫秒內外源物質(DNA,protein, etc.)進入細胞膜內,細胞膜再次瞬間關閉,最終使得外源物質在細胞內表達。


圖片6.jpg

【技術對比】

圖片5.jpg圖片3.jpg圖片4.jpg

1) 電擊管:兩端少量氣泡被壓縮,接近100%都是均勻有效區,可能是最后一代電轉技術。
2) 電極杯:有三點缺陷:①液面翹角處相當于電阻并聯,阻值變小,分到的電壓偏小,細胞不能電轉。  ②由于兩端總電壓相等,液面凹面下方分到的電壓增加導致此處細胞死亡。 ③下方液面電壓分配比較均勻,均勻有效區小。
3) 毛細管:有明顯的缺陷, ①區有效時,②區③區細胞無效;②區有效時,①區細胞死亡,③區無效。③區有效時,①區和②區細胞死亡。①②③區只能選一個最佳,不好兼顧。另外,毛細管沒有壓力,氣泡影響特別大,造成電弧、實驗失敗等。

圖2.png


【服務領域】

1. 有效的細胞:包括所有細胞系,原代細胞,干細胞,血液和免疫類細胞,神經細胞,植物細胞,胚胎以及細菌和酵母;
2. 可電轉的物質:包括DNA、RNA、SiRNA.蛋白質等;
3. 適用實驗:瞬時或穩定表達蛋白質、基因敲除與敲入、siRNA和其它分子機制研究;
4. 科研領域:細胞分子生物學、免疫學、血液學、神經學、癌癥研究、新藥開發等。


輕松電轉所有細胞系(貼壁與懸浮細胞)與原代真核細胞:

圖片10.jpg

【應用領域】

1. 細胞免疫治療新時代

(1)PBMC使用普通GFP質粒電轉結果與流式分析圖

1.png

普通GFP質粒電轉24h后效率大于80%



(2)PBMC使用SB轉座子系統表達CAR-T2A-GFP結果

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PBMC電轉轉座子14天后的CAR表達效率為65.9%,并且細胞狀態和未電轉的一樣穩定快速聚集生長

 

(3)7天擴增的NK細胞電轉后第7天(總培養14天)CD56-PE染色分析

 3.png

電轉GFP轉座子兩個質粒7天后,細胞用CD56-PE染色分析;NK細胞比例大約有86%;其中GFP陽性的有68%,比第四天稍有下降




2.基因編輯

基因編輯1.png

電轉Cas9和gRNA(+)或者Cas9蛋白,通過T7E1核酸內切酶檢測基因編輯效率,在APP, AAVS1, OCT4和PDCD1四個基因位點的編輯效率均超過50%,其中AAVSl基因位點編輯效率能達到70%

3.抗體生產

抗體1.png


CHO細胞電轉6kb小質粒瞬轉效率>99%
普通質粒瞬轉表達抗體
轉座子高效整合系統表達抗體

抗體2.png


CHO細胞電轉11kb較大質粒瞬轉效率>80%
GFP, mCherry代替HC,LC
含有GS篩選標記可做穩轉細胞株

 
4.干細胞電轉
Human iPSC 高效電轉、保持未分化狀態,可進行基因編輯
ACS-1030 transfection with GFP plasmid 72 hours(SBI, Coriell iPSC similar)

干細胞2.png



【電轉體系】

基礎款細胞電轉儀SP100:20ul、100ul兩個電轉體系;

升級款細胞電轉儀LE+:20ul,120ul,200ul三個電轉體系;

升級款細胞電轉儀EX+:可適配20ul、100ul、200ul、600ul、1ml電擊管;

大體積細胞電轉儀SLT:可適配200ul、1ml、5ml、10ml電擊管;

超高壓細菌、酵母電轉儀UHV:酵母電轉可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細菌電轉可適配20ul,100ul,600ul;

細菌、酵母、細胞電轉一體機UHV-Plus:酵母電轉可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細菌電轉可適配20ul,100ul,600ul;細胞電轉可適配20ul電擊管,細胞量0.5-3X10^6

8通道細胞電轉儀:適配200ul電擊管,可實現8個樣品同步電轉;兼容單個20ul、100ul電擊管的需求。


【產品參數】

電轉參數.png






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